과제명 : Electron Transfer Dissociation MS를 이용한 단백질과 펩타이드서열분석
- 분석구분
- 미래유망기술분석
- 과제수행자
- 엄*윤
- 분석일
- 2008-04-25 11:18:08.0
- 기술산업분류
- 바이오
- 작성기관
- 엄태윤
- 키워드
- 질량분석 펩타이드
- 과학기술표준분류
- 내용
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초기의 질량분석에 의한 단백질 분석은, 분리된 단백질을 효소 분해하여 생성된 펩티드의 분자량을 질량분석으로 측정하여 분해된 단백질 데이터베이스 검색을 통한 확인을 하는 “Peptide mass fingerprinting”기술이 개발되었다. 그 후에 GC-MS 기술의 진보에 따라 전체 단백질체를 효소 분해하고, 펩티드들을 GC로 분리한 후에 Tandem Mass Spectrometry(MS/MS)로 분리된 펲티드들을 확인하는 “Shotgun Proteomics" 기술이 개발되었다(3). 최근에는 단백질을 직접 분석하는 ”Top-down Proteomics"도 개발 중에 있다(4). 이러한 단백질 분석기술의 중심에는 질량분석기술의 개발이 대단히 중요한 위치를 차지하고 있다.
선택된 전구 펩티드이온의 충돌-활성화를 통한 에너지 재분배과정에서 가장 약한 결합의 절단이 일어난다. 펩티드 이온들이 중요한 번역 후 변형(Post- translational Modification, PTM)을 함유하게 되면 아마이드 골격 절단에 우선하여 변형 위치에서의 절단이 일어나게 된다. 예를 들면, 인산화 펩티드에서는 인산기가 골격의 아미이드기와 경쟁적인 양성자화를 하고 결과적으로 펩티드 이온으로부터 인산이 제거되는 m/z가 나타나 골격결합의 절단에 의한 펩티드 이온 조각들을 관찰할 수 없어 아미노산 서열을 알 수가 없다. 이러한 CAD-MS에 의한 전 단백질체 분석(Global Proteomics)의 한계는 새로운 이온화기술의 개발이 필요하게 되었다.
- 분석물
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