자가절단 도메인을 링커로 이용하는 재조합단백질의 단일 단계 정제 방법

전문가 제언

○ 바이오산업에서 재조합 단백질이 차지하는 비중은 대단히 높다. 이들 단백질에는 크게 백신 항원, 단일클론항체 그리고 진단제를 위한 각종 단백질이 포함된다. 이들 제품의 국제 경쟁력에 미치는 중요한 인자 중의 하나는 보다 높은 수준의 정제도와 고성능 제품의 생산이다.

 

○ 따라서 E. coli 배양액으로부터 생산되는 표적 단백질을 보다 고순도로 기능성을 유지하면서 정제하는 방법의 하나는 적합한 태그와 링커의 사용이다. 단일단계 정제과정은 여러 가지 이점을 가진 새로운 방법이다. 본 논문에서는 효율적인 링커의 선택과 이를 이용한 단일단계 정제 기술에 대해서 연구한 결과를 소개하고 있다. 선택된 링커 단백질인 MIIA 도메인은 광범위한 pH와 온도에서 작용하는 매우 유용한 물질인 것으로 확인되었다.

 

○ 태그를 사용하는 경우 이를 표적 단백질로부터 분리하는 과정이 문제이다. 이 과정에서 streptavidin-biotin 상호작용을 깨트리기 위한 강력한 조건들이 주어져야 하며 이러한 과정들은 정제할 대상 단백질의 성상을 파괴할 수 있다. 그러나 본 연구에서는 MIIA 도메인을 링커로 사용하고 칼슘이나 마그네슘 등 금속이온을 가하여 쉽게 표적 단백질을 태그로부터 쪼개어 냄으로 간편하게 표적 단백질만을 확보할 수 있었다. 이러한 과정은 streptavidin을 다시 사용할 수 있는 이점이 있는 등 단백질의 정제와 탐지를 위한 최적 체계를 제공한다.

 

○ 현재 많은 연구진들이 보다 효율적이고 기능이 우수한 링커 단백질을 개발하여 상용화하고 있다. 본 연구에서는 MIIA 도메인이 가장 우수한 것으로 보고되고 있다. 현재 다수의 바이오의약품 회사가 사용하는 단일클론 항체의 정제 방법은 A 단백질을 이용한 크로마토그래피 방법이다. 그러나 앞으로는 본 논문에서 소개하는 바와 같은 자가절단이 가능한 링커 단백질의 사용이 증가될 것으로 전망된다. 재조합단백질의 보다 효율적 생산을 위한 기술 발전이 계속 요구된다.

 

저자

Susan Ibe, Jana Schirrmeister, Susanne Zehner

자료유형

니즈학술정보

원문언어

영어

기업산업분류

바이오

연도

2015

권(호)

208()

잡지명

Journal of Biotechnology

과학기술
표준분류

바이오

페이지

22~27

분석자

신*오

분석물

• 자가절단 도메인을 링커로 이용하는 재조합 단백질의 단일단계 정제 방법.pdf [456,260 byte]

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