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지방산화효소의 효소에세이

전문가 제언
○ 지질산화효소는 철을 포함하는 효소과로 cis, cis-1-4-펜타다이인 구조를 갖는 지방인 다중불포화 지방산의 이산소화(dioxygenation) 반응을 촉매 한다. 지질산화효소는 식물, 동물 및 진균에 널리 퍼져 있다. 이 지질산화효소의 산물들은 다양한 세포기능에 관여한다. 예를 들면 식물의 성장, 해충저항, 상처에 대한 반응, 동물에서는 이들의 이소자임들이 프로스타글란딘 및 류코트리엔의 대사에 관여한다.

○ 여러 지질산화효소는 식물과 동물에서 C18 및 C20 지방산들(주로 아라키돈산)로부터 여러 하이드로퍼옥사이드(하이드로퍼옥시 아이코사트리엔산)를 생산한다. 이들 위치-특정적 산소와 다중불포화 지방산 간의 효소반응은 새로운 화합물들, 즉 옥시리핀들을 생산한다. 식물 C18 지방산들인 리놀레산 및 리놀렌산은 이들 효소에 의하여 이산소화효소, 9- 및 13-지질산화효소들을 생산하여 스트레스반응에 관여한다.

○ 지질산화효소 저해제들은 지질산화효소의 활성을 완화시키거나 정지 시키는 약제이다. 다시 말하면 필수 지방산들을 류코트리엔으로 전환하는 5-지질산화효소의 아라키돈염을 저해하는 것을 얘기할 때 항상 사용한다. 현재 사용하는 이들 약제로는 azelastine, 디에틸카바마진, nordihydroquaiaretic acid 및 zileuton 등이 있다.

○ 이러한 지질산화효소 저해제들의 확인 및 분석이 필요한데 여러 방법이 있으나 민감도가 떨어진다든가, 시간과 인력소비가 많다든가, 확실하고 정확한 형광을 보기 힘들든가 하여 실제 사용에는 문제가 많다. 특히 이들 에세이 방법을 최신 애용되고 있는 고효율 대량검색 방법에 응용하기 쉽지 않다.

○ 본 특허는 기존 사용하는 과산화수소 탐지용 AmplexUltraRed?을 사용하는 방법을 약간 개선하여 타 화합물의 방해를 받지 않는 형광신호를 생성한다. 즉 지질산화효소를 시험물질, 지질산화효소 기질 및 산소와 접촉시키고 형광시약 및 퍼옥시다아제를 사용하여 발생하는 형광신호를 측정하여 시험물질에 의한 효소저해량을 결정한다. 이는 간편하며 대량검색 방법에 활용할 수 있는 방법이다.
저자
BOEHRINGER INGELHEIM INTERNAIONAL GMBH
자료유형
특허정보
원문언어
영어
기업산업분류
바이오
연도
2008
권(호)
WO20080014198
잡지명
PCT특허
과학기술
표준분류
바이오
페이지
~15
분석자
이*현
분석물
담당부서 담당자 연락처
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