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Luciferase 형질전환 쥐(Rat)를 이용한 장기 보존액 스크리닝 시스템

전문가 제언: ○ 지금까지 많은 장기보존액이 개발되어 왔다. 그러나 장기보존효과의 단순평가가 어려웠기 때문에 개발하는 데는 경험이나 막대한 노력이 필요하였다. 본 논문에서 필자들은 Luciferase transgenic Rat 장기를 이용하여 장기보존액의 ATP(Adenosine TriPhosphate) 보존력을 지표로 하여 간단한 장기보존액의 스크리닝 시스템(Screening system)을 개발하였다.

○ 형질전환 기술을 이용하여 반딧불의 발광단백질 Luciferase를 전신에 발현하게 한 Luciferase(Luc) transgenic(Tg) Rat를 생산하여 이 Rat에 기질 Luciferin을 투여함으로써 Rat가 가진 Luciferase에 의해 Luciferin이 산화가 일어나 전신에서 발광되게 하였다. 이 반딧불 Luciferase-Luciferin으로 인한 발광반응에는 ATP가 필수이며 ATP를 율속으로 할 경우에 발광량은 ATP 양과 비례하는 것으로 알려져 있다.

○ 이번에 필자들이 보고하는 장기보존액의 스크리닝 시스템은 Luc Tg Rat에서 인하여 경시적으로 변화하는 것을 측정하는 시스템 적출한 장기를 보존액에 침적하고, 침적후의 발광 수준을 일정시간에 연속적으로 측정함으로써 간접적으로 보전장기 중의 ATP의 양 변화가 발광량인 것이다.

○ 개발된 장기보존액의 스크리닝 시스템에 관한 예를 이용하여 간단하게 설명하면 이 스크리닝 시스템은 장기보존액의 조성 검토를 과학적 근거에 기반을 둔 것으로 간단하고 대량의 검사를 단시간 안에 이루어지게 한 것이다. 이 시스템으로 인하여 보존 장기의 ATP 보유력 관점에서 기존의 보존액의 객관적인 평가가 간단하게 가능할 것으로 생각된다.

○ 각종 장기 보존액에서 첨가물질의 종류와 농도의 적정성 및 조성도 스크리닝이 가능하기 때문에 이 장기보존액 스크리닝 시스템에 의해서 기존의 장기보존액의 선별도 간단하게 평가될 수 있으며 앞으로 보다 좋은 장기보존액 개발이 비약적으로 발전해 갈 것으로 기대하게 된다.

저자: Takeshi Kikuchi, Jun Hotta, Eiji Kobayashi
자료유형: 학술정보